環(huán)保酵素的生產(chǎn)簡單易做，全過程不使用任何化學合成物質，具有加工原料隨處可得、工藝簡單、成本低廉等優(yōu)點，因而越來越多地被普通大眾所接受，逐漸走進家庭，滲透進國民大眾的日常生活中。

但家庭自制的環(huán)保酵素，在發(fā)酵材料、發(fā)酵用具、發(fā)酵條件、發(fā)酵工藝和后期處理等方面都較為隨意、簡易；菌群未完全鑒定清楚，成分未完全檢測清楚，也未作毒理分析。

本研究對環(huán)保酵素的微生物環(huán)境、主要功效酶活力和有機酸成分進行檢測分析，以期為人們認識和使用環(huán)保酵素提供科學依據(jù)。

材料與方法

環(huán)保酵素微生物檢測

環(huán)保酵素制成后，從當天開始，每相隔14d，即于第1天、第14天、第28天、第42天、第56天、第70天分別檢測2種環(huán)保酵素的細菌菌落總數(shù)、酵母菌和霉菌數(shù)量。菌落總數(shù)測定參照GB4789.2-2016;霉菌和酵母計數(shù)參照GB4789.15-2016。

于環(huán)保酵素制成后第30天，檢測2種環(huán)保酵素大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌和金黃色葡萄球菌等4種致病菌的情況。其中，大腸菌群計數(shù)參照GB4789.3-2016;沙門氏菌檢驗參照GB4789.4-2016;志賀氏菌檢驗參照GB4789.5-2012;金黃色葡萄球菌檢驗:參照GB4789.10-2016。

環(huán)保酵素主要功效酶活力測定

于環(huán)保酵素制成后第30天，測定2種環(huán)保酵素蛋白酶、脂肪酶和α-淀粉酶的酶活力情況。其中，蛋白酶活力測定采用福林法，參照GB/T 23527-2009;脂肪酶活力測定采用指示劑滴定法，參照GB/T 23535-2009;α-淀粉酶活力測定參照GB/T 24401-2009。

環(huán)保酵素有機酸的定性和定量測定

于環(huán)保酵素制成后第30天，采用**液相色譜法測定2種環(huán)保酵素中酒石酸、乙醇酸、L-蘋果酸、乳酸、檸檬酸、D-蘋果酸的含量。具體參照《化妝品安全技術規(guī)范(2015版)》中3.1α-羥基酸的測定方法。

未檢測到環(huán)保酵素中含有大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌和金黃色葡萄球菌等4種致病菌。未檢測到環(huán)保酵素含有α-淀粉酶，而蛋白酶和脂肪酶酶活力都極低。環(huán)保酵素含有酒石酸、乙醇酸、L-蘋果酸、乳酸和D-蘋果酸等有機酸，混合環(huán)保酵素還含有檸檬酸。發(fā)酵原料不同，環(huán)保酵素的微生物數(shù)量，有機酸種類和濃度也有差異。